Centro de Bachillerato Tecnológico industrial y de servicios no. 199
Nombre del alumno: Sarai Pérez Tovar
Dr. Vicente Martínez Fragoss.
Grado: 3º Grupo: DM
Laboratorista Clínico
Desarrollar técnicas parasitólogicas
Equipo no.2
Practica: “Método de concentración por sedimentación Ritchie”
Método de concentración por sedimentación Richie
Objetivo: Realizar un método de sedimentación con gran sensibilidad para detectar infecciones leves.
Fundamento: Se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.
Unas ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las formas parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.
Material: Material biológico: Sustancias:
*Centrifuga *Muestra de heces *Soluc. Salina isotónica
*Tubos de ensaye cónicos de 15ml *Soluc. De formaldehído al 5%
*Gasa cortada en cuadros *Éter
*Embudos de polietileno
*Vasos de precipitado de 50ml
*Aplicadores de madera
*Pipeta pasteur con bulbo
*Porta objetos
*Cubre objetos
*Microscopio
Método:
1.-Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1gr. De la materia fecal en el vaso de precipitados, se añade 10ml de solución salina y se homogeniza.
2.-Se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.
3.-Se centrifuga la suspensión durante 2min. A 2000 rpm.
4.-Se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con solución salina, centrifugando, decantando, y resuspendiendo 2 veces mas.
5.-Al ultimo sedimento se agrega 5ml de solución de formaldehído al 5% se mezcla y se deja reposar durante 10min.
6.-Se añade después 5ml de éter, se tapan los tubos con tapones de caucho y se agitan enérgicamente durante 30 segundos.
7.-Se centrifuga durante 2 minutos a 2000 rpm.
8.-Después de centrifugar se observan 4 capas:
-Éter en la superficial
-Un tapón de restos fecales
-Formaldehído
-Sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.
9.-Se decanta el sobrenadante.
10.-Se introduce la pipeta pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en el porta objetos.
11.-Se le añade una gota de lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos, se homogeniza, cubriendo con el mismo.
12.-Se observa la preparación en el microscopio con los objetivos de 10X y 40X.
Conclusión:
En la muestra que utilizamos se observaron grasas y quistes, así de esta manera aprendimos a identificar los distintos tipos de parásitos por su morfología y reforzamos nuestra capacidad para enfocar en el microscopio.
Ritchie es con T
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